飛凡檢測中心服務(wù)簡(jiǎn)介

當在細菌、酵母或哺乳動(dòng)物細胞系中表達時(shí)，宿主細胞蛋白 (Host Cell Protein, HCP) 通常與藥物產(chǎn)品共純化，是藥物產(chǎn)品在制造過(guò)程中經(jīng)常產(chǎn)生的雜質(zhì)。
HCP 通常是源自宿主生物體的低水平內源性蛋白質(zhì)，通常難以純化或檢測，成品中的 HCP 會(huì )降低藥物的療效或引起不良的免疫原性反應，影響治療活性。
檢測和表征 HCP 對于生物制藥表征分析至關(guān)重要。
譜奧特提供基于2D DIGE及基于質(zhì)譜的HCP分析。

飛凡檢測基于2D DIGE的HCP分析

飛凡檢測可通過(guò)使用高分辨率大面積的 2D 熒光蛋白質(zhì)印跡提供最全面的 HCP 抗體覆蓋率分析。
檢測結果包括 HCP、Western 印跡和 HCP/Western 疊加圖像，抗體覆蓋率可實(shí)現可視化，這是其他檢測方法無(wú)法實(shí)現的。
HCP 抗體覆蓋率的計算具有高度的一致性和準確性。
可用于表征 HCP 抗體覆蓋率及檢測蛋白類(lèi)生物藥和疫苗細胞在生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生的 HCP 污染物。

2D DIGE的HCP分析相較于 ELISA、和標準 2D 蛋白質(zhì)印跡具有顯著(zhù)優(yōu)勢：

1、一致性高：來(lái)自相同凝膠和相同膜的 HCP 和 WB 圖像進(jìn)行疊加，消除了傳統 2D WB 中出現的任何凝膠到凝膠或凝膠到膜的差異；

2、xingjiabigao：由于只需要一張凝膠，節省了重復凝膠的成本；

3、高精度：熒光 CyDye 標記可以準確定量蛋白質(zhì)和 WB 斑點(diǎn)；

4、高靈敏度：熒光 CyDye 標記比銀染具有更高的靈敏度和更寬的動(dòng)態(tài)范圍。

飛凡檢測基于質(zhì)譜的HCP分析

LC-MS/MS 包括 GeLC-MS/MS 蛋白質(zhì)組學(xué)分析可以鑒定混合物中的所有蛋白質(zhì)，從一維凝膠條帶、IP 樣品到全細胞裂解物或組織均可進(jìn)行HCP分析。
基于質(zhì)譜的HCP分析一般流程包括：通過(guò) pI 或 Mw 對蛋白質(zhì)混合物（1D 凝膠條帶或液體樣品）進(jìn)行蛋白質(zhì)分級（可選）；還原/烷基化和胰蛋白酶消化樣品后通過(guò)HPLC進(jìn)行分離后質(zhì)譜檢測；搜庫識別鑒定得到的蛋白質(zhì)信息。

飛凡檢測使用最新的高分辨率納米液相色譜電噴霧 (nanoLC-ESI) OrbiTrap 質(zhì)譜，我們可以以最高的準確性對這些含量極低的雜質(zhì)進(jìn)行檢測和表征。

1、樣品類(lèi)型：溶液樣品、凝膠內樣品或 IP 微珠均可送樣；

2、蛋白質(zhì)量：我們推薦每個(gè)樣品中 5-200 μg 的總蛋白質(zhì)；

3、蛋白質(zhì)濃度：我們推薦 5-20 mg/ml的樣品濃度；

4、緩沖液：理論上常規使用的緩沖液均可送養，但因涉及后續試驗，請告知我們您的緩沖液類(lèi)型。